Epidemiological surveillance of Human Papillomavirus (HPV) genotypes in oral and genital tracts and the impact of HPV vaccination on male university students from Rio de Janeiro state, Brazil / Vigilância Epidemiológica dos genótipos de papilomavírus humano (HPV) nos tratos oral e genital e o impacto da vacinação em estudantes universitários do sexo masculino do estado do Rio de Janeiro, Brasil

Introduction: Human Papillomavirus (HPV) infections are of significant concern in men, given its potential impact on their health and the risk of transmission to partners. Understanding and addressing this infection in men is crucial to evaluate the effectiveness of vaccination in reducing HPV-related diseases. Objective: To assess the impact of HPV vaccination, potential genotype shifts, and adverse effects, through a prospective study conducted with male university students. Methods:The study involved 286 volunteers who were examined at Sexually Transmitted Disease Clinics at the Universidade Federal Fluminense in Niterói, Rio de Janeiro, Brazil. The HPV prevalence was evaluated using generic PCR, genotyped by DNA microarray and monitored adverse effects. Results: The findings of this study revealed the absence of moderate or severe adverse effects. Genetic shifts were observed, including the disappearance of oncogenic HPV types 16 and 18. Surprisingly, even after completing the full vaccine regimen, students still harbored HPV11 in the oral tract. Furthermore, persistent HPV 6 and 11 infections were identified in three students, who had pre-existing infections prior to vaccination, at the follow-up visit. Multivariate analysis uncovered independent associations, notably an increased risk of HPV infection in the oral tract among men who have sex with men. HPV prevalence rates remained low both before and after the vaccination scheme (T0: 14.7%, T1: 8.7%). Even after the full vaccination scheme, the prevalence remained similar at T2 (14.6%), with no statistically significant differences recorded. HPV11 emerged as the most prevalent type throughout the study, followed by HPV6. Vaccine genotypes were detected in a significant proportion of samples at T0 (85.4%), T1 (89.5%), and T2 (100%). Conclusion: Overall, this study suggests that vaccination may represent a promising approach to reducing HPV-related health risks. These findings shed light on the potential benefits and challenges of HPV vaccination, emphasizing the need for continued monitoring and vaccination efforts

Introdução: As infecções por papilomavírus humano (HPV) são de grande preocupação em homens, dada sua possível influência na saúde deles e no risco de transmissão para parceiros. Compreender e abordar essa infecção em homens é fundamental para avaliar a eficácia da vacinação na redução de doenças relacionadas ao HPV. Objetivo: Avaliar o impacto da vacinação contra o HPV, possíveis alterações genotípicas e efeitos adversos, por meio de um estudo prospectivo realizado em estudantes universitários do sexo masculino. Métodos: O estudo envolveu 286 voluntários examinados em Clínicas de Doenças Sexualmente Transmissíveis na Universidade Federal Fluminense, em Niterói, Rio de Janeiro, Brasil. A prevalência do HPV foi avaliada por polymerase chain reaction (PCR) genérico e genotipada por microarranjo de DNA, e foram monitorados os efeitos adversos. Resultados: Os resultados deste estudo revelaram a ausência de efeitos adversos moderados ou graves. Observaram-se mudanças genéticas, incluindo o desaparecimento dos tipos oncogênicos do HPV 16 e 18. Surpreendentemente, mesmo após a conclusão do esquema completo de vacinação, os estudantes ainda abrigavam o HPV 11 na cavidade oral. Além disso, foram identificadas infecções persistentes pelo HPV 6 e 11 em três estudantes que já tinham infecções preexistentes antes da vacinação e na visita de acompanhamento. A análise multivariada revelou associações independentes, especialmente um aumento no risco de infecção pelo HPV na cavidade oral em homens que têm relações sexuais com homens. As taxas de prevalência do HPV permaneceram baixas tanto antes quanto depois do esquema de vacinação (T0: 14,7%, T1: 8,7%). Mesmo após a conclusão do esquema de vacinação, a prevalência permaneceu semelhante em T2 (14,6%), sem diferenças estatisticamente significativas registradas. O HPV 11 emergiu como o tipo mais prevalente ao longo do estudo, seguido pelo HPV 6. Genótipos da vacina foram detectados em uma proporção significativa de amostras em T0 (85,4%), T1 (89,5%) e T2 (100%). Conclusão: No geral, este estudo sugere que a vacinação pode representar uma abordagem promissora para a redução dos riscos à saúde relacionados ao HPV. Esses achados lançam luz sobre os benefícios e desafios potenciais da vacinação contra o HPV, enfatizando a necessidade de monitoramento contínuo e esforços de vacinação

Human Papillomavirus infection in oral and anogenital sites: prevalence and rates of concordance / Infecção pelo Papilomavírus Humano em regiões orais e anogenitais: prevalência e taxa de concordância

Introduction: HPV infection causes cancer at several anatomical sites. However, the infection's natural history in non-cervical sites is understudied. Objective: To evaluate oral and anogenital HPV infections, correlating HPV prevalence rates and genotypes with site of infection and risk factors. Methods: In the present study, 351 samples from oral, genital, and anal sites of 117 patients were investigated by using PCR MY09/11 detection, followed by genotyping with RFLP. Results: HPV DNA prevalence was 89.7% (105/117) in genital lesions, 53.8% (63/117) in oral samples, and 58.9% (69/117) in anal samples. Regarding the risk factors associated with HPV in genital lesions, statistically significant rates for oral (p=0.039) and anal sex practices (p=0.0000012) were found. For oral samples, a relevant correlation concerning oral contraceptive use (p=0.039), tobacco smoking (p=0.036), and alcohol use (p=0.0075) were observed; whereas in anal samples, higher risk for HPV infection in patients who reported non-exclusive sexual partners (p=0.013) were found. The presence of viral DNA in all the three sites concurrently was observed in 36.8% of the cases (43/117). Among them, 18% (21/117) presented concordant HPV genotypes, diverging from the literature, and thus corroborating that there is still much to learn about HPV natural history, since different biological behaviors are expected within different populations. Differences in anatomy and physiology of the studied sites can determine different prevalence rates of infection by diverse genotypes. Conclusion: Due to the high prevalence of HPV DNA in extragenital sites, further studies are required to define aspects of HPV natural history among different human anatomical sites.

Introdução: As infecções causadas pelos papilomavírus humanos (HPV) são responsáveis pelo desenvolvimento de cânceres em diversos sítios anatômicos humanos. Entretanto, a história natural da infecção em sítios que não a cérvice uterina não é muito clara. Objetivo: Avaliar infecções orais, genitais e anais por HPV, correlacionando taxas de prevalência do vírus e seus genótipos aos sítios de infecção e a fatores de risco sócio-demográficos. Métodos: Em nosso estudo, investigamos 351 amostras coletadas dos sítios oral, genital e anal de 117 pacientes, por meio da técnica de PCR MY09/11, seguida de genotipagem por RFLP. Todos os pacientes apresentavam lesões genitais benignas. Resultados: A prevalência do HPV foi de 89,7% (105/117) nas lesões genitais, 53,8% (63/117) nas amostras orais e 58,9% (69/117) nas amostras anais. Em relação aos fatores de risco associados à infecção genital, encontramos diferenças estatísticas significativas para prática de sexo oral (p=0,039) e sexo anal (p=0,0000012). Já para as amostras orais, observamos importante correlação entre infecção e uso de contraceptivo oral (p=0,039), tabagismo (p=0,036) e uso de álcool (p=0,0075) enquanto nas amostras anais, alto risco de infecção pelo HPV foi associado a pacientes relatando parceiros sexuais não exclusivos (p=0,013). A presença do DNA viral simultaneamente nos três sítios estudados foi observada em 36,8% dos casos (43/117). Desses, 18% (21/117) apresentaram genótipos concordantes, diferindo da literatura, na qual há grande disparidade de descrições. Conclusão: Há a necessidade de novos estudos a fim de esclarecer a história natural do HPV em sítios extragenitais em diferentes populações, avaliando características anatômicas e fisiológicas com o intuito de esclarecer diferentes taxas de infecção por genótipos do HPV e diferentes processos de doença.

Knowledge of human papillomavirus and Pap test among Brazilian university students

SUMMARY OBJECTIVE: Human papillomavirus (HPV) is the most prevalent sexually transmitted virus in the world and is associated with an increased risk of cervical cancer. The most effective approach to cervical cancer control continues to be screening through the preventive Papanicolaou test (Pap test). This study analyzes the knowledge of university students of health science programs as well as undergraduate courses in other areas of knowledge on important questions regarding HPV. METHOD: Four hundred and seventy-three university students completed a questionnaire assessing their overall knowledge regarding HPV infection, cervical cancer, and the Pap test. A descriptive analysis is presented, and multivariate analysis using logistic regression identified factors associated with HPV/cervical cancer information. RESULTS: Knowledge was higher for simple HPV-related and Pap test questions but was lower for HPV interrelations with genital warts and cervical cancer. Being from the health science fields and having high income were factors associated with greater knowledge. Only the minority of the participants recognized all the situations that increased the risk of virus infection presented in the questionnaire. CONCLUSIONS: These findings highlight the need for educational campaigns regarding HPV infection, its potential as a cervical cancer agent and the forms of prevention available.

RESUMO OBJETIVO: O papilomavírus humano (HPV) é o vírus sexualmente transmissível mais prevalente no mundo, estando a infecção por este agente associada a um aumento do risco do câncer de colo uterino. A abordagem mais eficaz para o controle desse tipo de câncer continua sendo a triagem por meio do exame preventivo (Papanicolaou). Este estudo analisa o conhecimento de estudantes universitárias de cursos da área da saúde, bem como cursos de graduação de outras áreas do conhecimento com relação a questões importantes sobre o HPV. MÉTODO: Quatrocentas e setenta e três estudantes universitárias responderam a um questionário que avaliava os conhecimentos sobre a infecção pelo HPV, o câncer de colo do útero e o exame preventivo. Após análise descritiva, foi feita a análise multivariada por regressão logística para identificação dos fatores associados à informação sobre o HPV/câncer de colo do útero. RESULTADOS: O conhecimento das universitárias foi maior para questões simples relacionadas ao HPV e ao exame preventivo, mas foi menor para as correlações do HPV com verrugas genitais e com o câncer de colo do útero. Ser aluna da área da saúde e ter alta renda foram fatores associados ao maior conhecimento. Somente uma minoria das participantes reconheceu todas as situações que aumentavam o risco de infecção pelo HPV apresentadas no questionário. CONCLUSÃO: Os resultados evidenciam a necessidade de realização de campanhas educativas sobre a infecção pelo HPV, do seu potencial como agente de câncer do colo uterino e as formas de prevenção disponíveis.

Methylation of p16 ink4a promoter is independent of human papillomavirus DNA physical state: a comparison between cervical pre-neoplastic and neoplastic samples

BACKGROUND Epigenetic modifications in host cells, like p16 ink4a methylation, have been considered as putative complementary mechanisms for cancer development. Because only a small proportion of infected women develop cervical cancer, other factors might be involved in carcinogenesis, either independently or in association with high-risk human papillomavirus (HR-HPV) infections, including epigenetic factors. OBJECTIVES We hypothesised that p16 ink4a methylation might have a role in cancer development driven by HPV16, mainly in the presence of intact E1/E2 genes. Thus, our objectives were to assess the status of p16 ink4a methylation and the HPV16 E1/E2 integrity in samples in different stages of cervical diseases. METHODS Presence of HPV16 was determined by E6 type-specific polymerase chain reaction (PCR). Methylation status of the p16 ink4a promoter was assessed by methylation-specific PCR in 87 cervical specimens comprising 29 low-grade (LSIL), 41 high-grade (HSIL) lesions, and 17 cervical cancers (CC). Characterisation of E1 and E2 disruption (as an indirect indicator of the presence of episomal viral DNA) was performed by PCR amplifications. FINDINGS We observed a significantly increased trend (nptrend = 0.0320) in the proportion of methylated p16 ink4a in cervical samples during cancer development. Concomitant E1 and E2 disruptions were the most frequent pattern found in all groups: CC (76%), HSIL (54%), and LSIL (73%). No statistically significant differences between p16 ink4a methylation and E1/E2 integrity, in histological groups, was observed. MAIN CONCLUSIONS There was an increase in methylation of the p16 ink4a promoter from pre-neoplastic lesions to cancer. Additionally, a high frequency of E1/E2 disruptions in LSIL/HSIL suggested that viral DNA integration was an early event in cervical disease. Moreover, the methylation status was apparently independent of HPV16 integrity.

Evaluation of anogenital human papillomavirus infection in asymptomatic men from Rio de Janeiro, Brazil

Infection by human papillomavirus (HPV) is among the most prevalent sexually transmitted diseases worldwide. However, there are still gaps in the knowledge regarding the natural history of HPV infection in men. This study aimed to determine the prevalence of HPV infection in penile swab samples, derived from a clinically asymptomatic male population. For this purpose, 261 samples were collected between January 2011 and July 2013 in different institutions in the city of Rio de Janeiro. These samples were collected from the glans, corona, frenulum and coronal sulcus of the penis. Viral identification was made through generic and type-specific Polymerase Chain Reaction, and Restriction Fragment Length Polymorphism techniques. Prevalence of HPV infection was 16.5% (43 subjects). The most prevalent HPV type was HPV6 (34.9%), followed by HPV16 (23.3%), HPV11 (16.3%), HPV45 (9.3%) and HPV58 (2.3%). Hence, infection was associated with low-risk oncogenic types in 53.7% of the studied individuals, while high-risk oncogenic types were detected in 46.3%. Statistically significant results were found for the group of men who have sex with men, the group who have active anal intercourse, and subjects that lacked circumcision. After adjustments, sexual behavior and lack of circumcision remained as independent risk factors for HPV infection. We believe that these results may contribute to a clearer view about the circulation of HPV in the general male population, as well as to the identification of risk factors associated with the epidemiology of HPV infection in our state.

Proteomics analysis of tissue samples from patients with squamous cell carcinoma of the penis and positive to human papillomavirus

ABSTRACTPurpose:The aim of this study was to identify possible protein biomarkers and/or candidates for therapeutic targets in tissues of patients with SCCP, infected by HPV, applying one dimensional electrophoresis (1DE), followed by direct mass spectrometry (MS) analysis.Materials and Methods:Tissues from 10 HPV positive patients with SCCP and from 10 patients with HPV negative non-tumorous penile foreskins were analyzed applying 1D electrophoresis, followed by analysis with direct mass spectrometry (MS).Results:Sixty-three different proteins were identified in the first group and 50 in the second group. Recognition was possible for 28 proteins exclusively detected in Group 1 and 21 proteins presented only in Group 2.Conclusion:Some proteins in the first group are directly involved in the development of other types of cancer, and therefore, suitable for analysis. Complement C3 protein is a strong candidate for evaluating SCCP patients.

Human papillomavirus infection inhealthy men from Rio de Janeiro, Brazil / Infecções por papilomavírus humanos em homens saudáveis do Rio de Janeiro, Brasil

Genital infections by human papillomavirus (HPV) are the most prevalent sexually transmitted viral diseases worldwide. Although the naturalhistory of cervical cancer is better understood, there are still scarce information regarding the etiology of penile cancer, and the natural history of HPV infection in men is not yet fully elucidated. Objective: This study aimed to determine the prevalence of HPV infection in penile samples, from a clinicall yasymptomatic male population. Methods: A total of 550 samples were collected between January 2011 and July 2014 in different institutions in the Stateof Rio de Janeiro, including a dermatology clinic and a metallurgical company. The samples were collected from the anatomical regions of the glans andbalanopreputial sulcus. HPV identification was made through the generic and type-specific Polymerase Chain Reaction (PCR), and Restriction FragmentLength Polymorphism (RFLP) techniques. Results: An overall prevalence of HPV infection was observed in 21.8% (120 subjects). The most prevalent HPV type was HPV 6 (35%), followed by HPV 16 (20.8%), HPV 11 (19.1%), HPV 31 (6.7%), HPV 33 (6.7%), HPV 45 (8.3%) and HPV 58 (3.3%). Hence,infection was associated with low-risk oncogenic types in 54.1% of the studied individuals, while high-risk oncogenic types were detected in 45.9% ofthem. The age of the studied subjects ranged from 18 to 65 years with a mean age of 28.4 years. Conclusion: According to our findings, we can infer thatthe prevalence of HPV infection among asymptomatic male population was considerably lower than the described in the literature, although in agreementwith results reported in some recently published studies. We believe that the results may contribute to understand the features of circulation of HPV in malepopulation, in order to evaluate risk-benefits and strategies of disease prevention.

As infecções genitais pelo Papilomavírus humano (HPV) são hoje as mais prevalentes viroses de transmissão sexual em todo o mundo. Embora a história natural do câncer cervical seja melhor compreendida, pouco se sabe sobre a etiologia do câncer de pênis e a história natural do HPV no homem não está completamente elucidada. Objetivo: Este estudo teve como objetivo, determinar a prevalência do HPV em amostras penianas de uma população masculina assintomática. Métodos: Foram coletadas 550 amostras entre janeiro de 2011 e julho de 2014 em diferentes instituições do Estado do Rio de Janeiro, dentre elas:uma clínica de dermatologia e uma indústria metalúrgica. As amostras foram coletadas de sítios anatômicos como sulco balanoprepucional. A identificação do HPV foi feita pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) genérica e tipo-específica, bem como pelo Polimorfismo do padrão de comprimento de fragmentos de restrição (RFLP). Resultados: A prevalência total da infecção pelo HPV foi de 21,8% (120 indivíduos). O tipo viral de maior prevalência foi o HPV 6 (35%),seguido pelo HPV 16 (20,8%), HPV 11 (19,1%), HPV 31 (6,7%), HPV 33 (6,7%), HPV 45 (8,3%) e HPV 58 (3,3%). A infecção foi majoritariamente associada a tipos de baixo risco oncogênico (54,1%), enquanto os genótipos oncogênicos foram detectados em 45,9% dos pacientes. A idade dos pacientes variou de 18 a 65 anos com média de 28,4. Conclusão: De acordo com nossos achados, podemos sugerir que a prevalência do HPV na população masculina assintomática foi consideravelmente menor do que a descrita em alguns estudos da literatura, mas em acordo com o reportado recentemente por vários autores. Acreditamos que estes resultados podem contribuir para a compreensão dos aspectos epidemiológicos associados à infecção no trato genital masculino, a fim de avaliar estratégias de prevenção de doenças associadas e avaliar o risco-benefício das diferentes abordagens aplicadas em Saúde-Pública.

Genital herpes on the penis and topicuse of uncaria tomentosa: case report / Herpes genital peniano e uso tópico gel de uncaria tomentosa: relato de caso

Genital herpes is an infectious sexually transmitted disease that affects people from different socioeconomic strata, it is widespread throughout the world and a frequent cause of painful genital lesions in men and women. Objective and Methods: to report a case of a patient with penile ulcers initially treated with various topical and oral products, who finally used Uncaria tomentosa gel topically. The final diagnosis was genital herpes. Results:The symptoms of pain and burning had rapid remission. The clinical course was satisfactory and after a week, the patient, with no lesion, reported having had sexual intercourse without discomfort and returned to professional activities. Conclusion: the topical use of Uncaria tomentosa gel 50 mg/g in penile ulcers was well tolerated, and showed no side effects with relief of local symptoms.

Herpes genital é uma doença infectocontagiosa de transmissão sexual que acomete pessoas das mais diversas camadas socioeconômicas e está disseminada em todo o mundo, sendo uma causa frequente de lesões genitais dolorosas em homens e em mulheres. Objetivo e Métodos: descrever caso de paciente com úlceras penianas inicialmente medicado com vários produtos tópicos e orais que por último usou, topicamente, gel de Uncaria tomentosa e o diagnóstico final foi herpes genital. Resultados: os sintomas de dor e ardor tiveram rápida remissão. A evolução clínica foi satisfatória e após uma semana o paciente, já sem lesão, informou ter tido relação sexual sem incômodos e retomado as atividades profissionais de forma plena. Conclusão: o uso tópico de gel de Uncaria tomentosa 50 mg/g em úlceras penianas foi bem tolerado, não teve efeitos colaterais com alívio dos sintomas locais.

Human papillomavirus infection in multiple sites / Infecção por papilomavírus humano em múltiplos sítios

Studies concerning human papillomavirus natural history have been focused on cervical infection and disease, but have scarcely describedanal infections, especially in clinically health population. Hence, knowledge on HPV natural history is recently being investigated although viral maintenance in hosts is poorly understood. Detection on diverse, extragenital sites may add in the elucidation of infection-dissemination-reinfection cycle reported onthe human genital tract. Besides that, it is evident the importance of an adequate screening of the viruses for appropriate diagnosis, mainly in the first steps of the neoplasia in order to provide a better prognosis. Our results pointed out HPV prevalence rates in genital lesions of 87% (80/92) and of 47.8%(44/92) for anal samples. We pointed out that this high prevalence is due to clinically detected lesions, that contributes to the risk of extragenital infections,mainly by host auto-inoculation. Despite the difference in samples size, we did not find statistical relevant differences related with genera (men 85.1% and women 92%; p>0.05), corroborating the idea of no tropism differences by sex. Never heless, for anal samples, statistically significant differences werefound between men and women (68% of anal HPV infection in women against 40.3% in men (p=0.038). These results reveal that female anal infections are more frequent than in men, suggesting that infection by auto inoculation occurs and can render this site as an HPV reservoir, occasionally becoming clinical lesions. Hormonal profile, sexual behavior and differences among body sites can explain these differences here described. Our study is a preliminaryevaluation of HPV infection in human multiple sites.

Muitos estudos sobre a história natural do papilomavírus humano (HPV) têm focado nas infecções cervicais, mas pouco tem se falado sobre infecções anais em pacientes assintomáticos. Assim, a história natural do HPV ainda está em construção e os mecanismos de manutenção dele no organismo hospedeiro são pouco compreendidos. Entendemos que a detecção do vírus em sítios extragenitais poderá ajudar na compreensão da cadeia de infecção disseminação-reinfecção pelo HPV no trato genital humano. Além disso, é evidente a importância de um rastreio adequado do vírus diante de diagnósticos clínicos, principalmente no período inicial da lesão, provendo, assim, um melhor prognóstico. Nossos resultados apontaram uma prevalência da infecção por HPV em lesões genitais de 87% (80/92) e nas amostras anais tal prevalência foi de 47,8% (44/92). Ressaltamos que nossa prevalência foi alta, mas estudamos indivíduos com lesões genitais clinicamente detectadas, aumentando, assim, o risco de infecção em outros sítios e confirmando a ocorrência da presença do HPV no hospedeiro, provavelmente decorrente de autoinoculação. Apesar da diferença entre o número de indivíduos dos sexos feminino e masculino em nosso estudo, não encontramos diferenças estatísticas relacionadas à presença do HPV em lesões genitais (H: 85,1% e M: 92%; p>0.05),corroborando que não há diferenças entre o tropismo por gênero referente às infecções genitais. Entretanto, no caso das infecções anais, a porcentagem foi estatisticamente diferente: 68% de HPV anal em mulheres e 40,3% em homens (p=0,038). Estes resultados apontam que a aquisição da infecção anal em mulheres, apesar de assintomática, é mais frequente do que em homens, sugerindo que esta mucosa possa ser infectada por autoinoculação e funcionar como um reservatório feminino, o que eventualmente poderá resultar em lesões. Tais discrepâncias da prevalência entre homens e mulheres poderiam se explicadas pelo comportamento sexual, por efeitos hormonais e por diferenças entre sítios. Nosso estudo se trata de um levantamento preliminar da infecção por HPV em múltiplos sítios.

An upward trendiin dna p16ink4a methylation patern and high risk hpv infectionn according to the severity of the cervical lesion / Padrão de metilação do gene P16INK4A e de infecções por HPV de alto risco acompanham a evolução de lesões cervicais

SUMMARY High-risk human papillomavirus (hr-HPV) infection is necessary but not sufficient for cervical cancer development. Recently, P16INK4A gene silencing through hypermethylation has been proposed as an important cofactor in cervical carcinogenesis due to its tumor suppressor function. We aimed to investigate P16INK4A methylation status in normal and neoplastic epithelia and evaluate an association with HPV infection and genotype. This cross-sectional study was performed with 141 cervical samples from patients attending Hospital Moncorvo Filho, Rio de Janeiro. HPV detection and genotyping were performed through PCR and P16INK4A methylation by nested-methylation specific PCR (MSP). HPV frequency was 62.4% (88/141). The most common HPV were HPV16 (37%), HPV18 (16.3%) and HPV33/45(15.2%). An upward trend was observed concerning P16INK4A methylation and lesion degree: normal epithelia (10.7%), low grade lesions (22.9%), high grade (57.1%) and carcinoma (93.1%) (p < 0.0001). A multivariate analysis was performed to evaluate an association between methylation, age, tobacco exposure, HPV infection and genotyping. A correlation was found concerning methylation with HPV infection (p < 0.0001), hr-HPV (p = 0.01), HSIL (p < 0.0007) and malignant lesions (p < 0.0001). Since viral infection and epigenetic alterations are related to cervical carcinoma, we suggest that P16INK4A methylation profile maybe thoroughly investigated as a biomarker to identify patients at risk of cancer. .

RESUMO É reconhecido que infecções por papilomavírus humanos de alto risco (HPV) são causa necessária, mas não suficiente para o desenvolvimento do câncer cervical. Recentemente, estudos de silenciamento gênico apontaram que a hipermetilação do gene p16INK4A é importante co-fator para a carcinogênese cervical, eliminando a função supressora de tumor da proteína p16 em lesões malignas. Entretanto poucos estudos avaliaram a relação da metilação com a progressão da doença. Nosso objetivo foi investigar o padrão de metilação do gene P16INK4A em diferentes graus de lesão cervical e sua associação com a infecção por diferentes tipos de HPV. Nosso estudo de corte transversal avaliou 141 amostras cervicais de pacientes atendidas no Hospital Moncorvo Filho, Rio de Janeiro. A detecção e tipagem do HPV foi realizada pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR), e a metilação do gene P16INK4A pela PCR-metilação específica em formato nested (MSP). A frequência de HPV foi de 62,4% (88/141). O tipo mais prevalente foi o HPV16 (37%), seguido pelo HPV18 (16,3%) e HPV33/45 (15,2%). Curva ascendente foi observada quanto ao padrão de metilação do gene P16INK4A e o grau da lesão: a metilação foi identificada em somente 10,7% das amostras de epitélio normal, em 22,9% das lesões de baixo grau, em 57,1% das lesões de alto grau e em 93,1% dos carcinomas (p < 0,0001). Foram feitas análises univariada e multivariada a fim de correlacionar metilação, idade, exposição ao tabaco, infecção e genótipo de HPV. Foi encontrada correlação da metilação com a infecção pelo HPV (p < 0,0001), genótipos de alto risco (p = 0,01), ...

Prevalence of human papillomavirus and Epstein-Barr virus DNA in penile cancer cases from Brazil

Penile cancer is a potentially mutilating disease. Although its occurrence is relatively rare worldwide, penile cancer rates can be high in developing countries. A few studies have been conducted on the involvement of human papillomavirus (HPV) in penile carcinoma, which have found HPV present in 30-70 percent of penile malignant lesions, with a higher prevalence of HPV 16 and 18. It has been assumed that cofactors, such as Epstein-Barr virus (EBV) infections, may play a role in the progression of penile neoplasia. The aim of this study was to determine HPV and EBV prevalence in 135 penile malignant lesions from Brazilian men through the use of MY09/11 polymerase chain reaction (PCR), type-specific PCR and restriction fragment length polymorphism analysis. HPV prevalence among the men tested was 60.7 percent. Of the men who tested positive, 27 presented with HPV 16 (29.7 percent), five with HPV 18 (5.5 percent), 21 with HPV 45 (23.1 percent) and nine with HPV 6 (9.9 percent). Seven mixed infections were detected (9.2 percent), while 11 cases remained untyped (13.4 percent). Regarding EBV positivity, 46.7 percent of the samples contained EBV DNA with EBV-1 as the most prevalent type (74.6 percent). More than 23 percent of the men were co-infected with both HPV and EBV, while 35 percent presented exclusively with HPV DNA and 20 percent presented only with EBV DNA. Penile carcinoma aetiology has not been fully elucidated and the role of HPV and EBV infections individually or synergistically is still controversial. Hence, more studies are needed to determine their possible role in carcinogenesis.

Diagnosis of human herpesvirus 6B primary infection by polymerase chain reaction in young children with exanthematic disease / Diagnóstico de infecção primária pelo herpesvírus humano tipo 6B através da técnica de reação em cadeia da polimerase em crianças com doença exantemática

INTRODUCTION: Exanthem subitum is a classical rash disease of early childhood caused by human herpesvirus 6B (HHV-6B). However, the rash is frequently misdiagnosed as that of either measles or rubella. METHODS: In this study, a nested multiplex polymerase chain reaction (PCR) was used to diagnose HHV-6B primary infection, differentiate it from infections caused by HHV-6A and compare it to antibody avidity tests. The samples were separated into case group and control group according to the results of the indirect immunofluorescence assay (IFA) technique. RESULTS: From the saliva samples analyzed, HHV-6A DNA was detected in 3.2 percent of the case group and in 2.6 percent of the control group. Regarding HHV-6B, PCR detected viral DNA in 4.8 percent of the case group and in 1.3 percent of the control group. Among the serum samples studied, a frequency of 1.7 percent was determined for HHV-6A in the case group and 1.2 percent in the control group. PCR did not detect HHV-6B DNA in serum samples. The sensitivity and specificity of the PCR technique ranged from 0 percent to 4.8 percent and 97.5 percent to 100 percent, respectively, compared to IFA. CONCLUSIONS: The PCR technique was not suitable for diagnosing primary infection by HHV-6B in children with exanthematic disease and should not substitute the IFA.

INTRODUÇÃO: O exantema súbito é uma doença comum durante a infância e pode ser causada pela infecção por herpesvirus humano tipo 6B (HHV-6B). No entanto, a erupção cutânea característica dessa doença, é frequentemente confundida com outras viroses como sarampo ou rubéola. MÉTODOS: Foi utilizada a técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) no formato nested multiplex para o diagnóstico de infecção primária por HHV-6B, diferenciação entre as infecções causadas pelo HHV-6A e comparação com testes de avidez de anticorpos. As amostras foram separadas em grupo caso e grupo controle, de acordo com os resultados do teste de imunofluorescência indireta (IFA). RESULTADOS: Nas amostras de saliva analisadas, o DNA do HHV-6A foi detectado em 3,2 por cento no grupo caso e em 2,6 por cento das amostras do grupo controle. Em relação ao HHV-6B, o DNA viral foi observado em 4,8 por cento no grupo caso e em 1,3 por cento no grupo controle. Após a realização da PCR nas amostras de soro, o DNA do HHV-6A foi detectado em 1,7 por cento no grupo caso e em 1,2 por cento no grupo controle, enquanto o DNA do HHV-6B não foi detectado. A sensibilidade e a especificidade da técnica de PCR variaram de 0 por cento a 4,8 por cento e de 97,5 por cento a 100 por cento, respectivamente, quando comparado com a IFA. CONCLUSÕES: A técnica de PCR não se mostrou adequada para o diagnóstico de infecção primária pelo HHV-6B em crianças com doença exantemática e não deve substituir a IFA.

Detection of human herpesvirus 7 infection in young children presenting with exanthema subitum

In this study, we assessed the prevalence of human herpesvirus-7 (HHV-7) in 141 serum samples from children less than four years of age with exanthematic disease. All samples were negative for measles, rubella, dengue fever and parvovirus B19 infection. Testing for the presence of human herpesvirus-6 (HHV-6)-specific high avidity IgG antibodies by indirect immunofluorescence assay (IFA) revealed two main groups: one composed of 57 patients with recent primary HHV-6 infection and another group of 68 patients showing signs of past HHV-6 infection. Another 16 samples had indeterminate primary HHV-6 infection, by both IgG IFA and IgM IFA. Serum samples were subjected to a nested polymerase chain reaction to detect the presence of HHV-7 DNA. Among patients with a recent primary HHV-6 infection, HHV-7 DNA was present in 1.7 percent of individuals; however, 5.8 percent of individuals tested positive for HHV-7 DNA in the group with past primary HHV-6 infection. Among the 16 samples with indeterminate diagnosis, 25 percent (4/16) had HHV-7 DNA (p < 0.002). We hypothesise that HHV-7 might be the agent that causes exanthema. However, a relationship between clinical manifestations and the detection of virus DNA does not always exist. Therefore, a careful interpretation is necessary to diagnose a primary infection or a virus-associated disease. In conclusion, we detected HHV-7 DNA in young children from the state of Rio de Janeiro, Brazil.

Human papillomavirus genotypes in asymptomatic young women from public schools in Rio de Janeiro, Brazil / Genótipos de papilomavírus humanos em mulheres jovens assintomáticas de escolas públicas do Rio de Janeiro, Brasil

INTRODUCTION: The aim of this work was to survey HPV information from a random population of young women from Rio de Janeiro, Brazil. METHODS: This cross-sectional study included cervical samples from 241 female students. To determine human papillomavirus status, polymerase chain reaction amplification was performed. HPV typing was determined by restriction fragment length polymorphism analysis. Demographic data, life style, sexual and gynecological history were obtained through use of a structured questionnaire. RESULTS: The average age of the women was 19.6 years-old (SD=3.4 years). HPV prevalence was 27.4 percent. Nineteen different HPV genotypes were detected, including 13 high risk types. HPV 16 was the most prevalent type (6.2 percent), followed by 31 (4.1 percent) and 66 (3.7 percent). Most of the oncogenic types belonged to the A9 species (28/48). The frequency of women infected by at least one oncogenic type was significantly higher than those only infected by low risk types (18.7 percent versus 7.5 percent). Cervical changes were detected in 12.5 percent of the sample and were significantly linked to infection with HPV types of the A9 species. Demographic variables, sexual initiation, or number of sexual partners were not associated with HPV prevalence, variety of HPV genotypes or oncogenic types. CONCLUSIONS: The relative frequency of HPV genotypes other than vaccine types in young females should be taken into account when evaluating vaccination strategies. Due to the high prevalence of HPV infection among the population studied, implementation of sex education in schools, promotion of condom use and an organized screening program to prevent cervical cancer must be encouraged for this age group.

INTRODUÇÃO: O objetivo deste trabalho foi investigar a infecção por HPV em uma população randômica de mulheres jovens no estado do Rio de Janeiro, Brasil. MÉTODOS: Este estudo incluiu amostras cervicais de 241 jovens. A detecção de papilomavírus humanos foi realizada pela reação da cadeia da polimerase e a tipificação deste vírus determinada pelo polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição. Dados demográficos, estilo de vida, história sexual e ginecológica foram obtidos através de um questionário. A média de idade das mulheres foi 19,6 anos (SD=3,4). RESULTADOS: A prevalência de HPV foi de 27,4 por cento e 19 diferentes tipos foram detectados, incluindo 13 oncogênicos. O HPV 16 foi o tipo mais prevalente (6,2 por cento), seguido do 31 (4,1 por cento) e do 66 (3,7 por cento). A maioria dos tipos oncogênicos pertencia à espécie A9 (28/48). A frequência de mulheres infectadas por ao menos um tipo oncogênico foi significantemente mais alta do que aquelas infectadas por tipos de baixo risco (18,7 por cento versus 7,5 por cento). Alterações cervicais foram detectadas em 12,5 por cento das jovens e foram positivamente relacionadas a tipos de HPV da espécie A9. Variáveis demográficas, iniciação sexual e número de parceiros sexuais não foram associados com a prevalência de HPV, variedade de genótipos ou tipos oncogênicos. CONCLUSÕES: A frequência razoável de outros genótipos além dos vacinais nestas jovens deve ser considerada para avaliação de estratégias de vacinação. Devido à alta prevalência de HPV na população estudada, a implantação de educação sexual nas escolas, incentivo ao uso de preservativo e exames preventivos devem ser encorajados nesta faixa etária.

Há aumento de dst no carnaval? Série temporal de diagnósticos em uma clínica de DST / Is there increase of std during carnival? Time series of diagnoses in a STD clinic

OBJETIVO: As doenças sexualmente transmissíveis (DST) são causas frequentes de procura por serviços de saúde. As campanhas de mídia sobre DST/Aids apoiam-se na hipótese de que há maior exposição às práticas de risco para DST na época do Carnaval. Nosso objetivo é estudar a distribuição temporal dos atendimentos de primeira vez em uma clínica de DST no período de janeiro de 1993 a dezembro de 2005, visando verificar se há um aumento sazonal após o Carnaval. MÉTODOS: Selecionamos 2.646 prontuários com diagnóstico de gonorreia, sífilis e tricomoníase de pacientes que procuraram o Setor de DST da Universidade Federal Fluminense em Niterói, Rio de Janeiro, Brasil. Na análise estatística, utilizamos observação da média padronizada do número de atendimentos para os 13 anos, mês a mês, ano a ano, observação da série suavizada pelo método Lowess e pelo método determinístico da média móvel. RESULTADOS: Os meses de julho e agosto concentraram o maior número de diagnósticos de gonorreia e sífilis e os de junho e julho, os de tricomoníase. A gonorreia apresentou um valor máximo em maio, tendendo a se reduzir até agosto. Com relação à sífilis, observou-se um número de diagnósticos constantes entre maio e agosto, havendo menor número em janeiro e fevereiro com pico em novembro. O comportamento sazonal para a tricomoníase exibiu um máximo de diagnóstico em julho com tendência consistente de redução até o mês de dezembro, e elevação a partir de janeiro. CONCLUSÃO: O Carnaval não influencia no aumento da ocorrência de gonorréia, sífilis e tricomoníase em pacientes atendidos em uma clínica de DST em Niterói, Rio de Janeiro.

OBJECTIVE: Sexually Transmitted Diseases (STD) are often the cause for search for medical assistance. Media campaigns on STD/Aids presume that exposure to sexual risk practices during Carnival is greater than in other periods of the year. The objective here is to study the temporal distribution of first consultations in a STD clinic, from January, 1993, to December, 2005, to verify whether there is a seasonal increase of STD after Carnival. METHODS: Two thousand, six hundred and fifty six (2,656) records of patients who had received a diagnosis of gonorrhea, syphilisor trichomoniasis were selected. These patients at the time had looked for assistance at the STD Division of the Universidade Federal Fluminense, in Niterói, State of Rio de Janeiro, Brazil. The standardized mean of the number of consultations during those 13 years, month by month, and year by year was observed in the statistical analysis and also smoothed series by the Lowess method and by the deterministic method of the variable mean was considered. RESULTS: July and August showed an increased number of diagnoses for gonorrhea and syphilis, while in June and July there was a concentration of trichomoniasis diagnoses. Gonorrhea presented its highest value in May, tending to a reduction until August. A constant number of syphilis diagnoses was noted between May and August, with a decreased number in January and February, reaching a peak in November. The seasonal behavior of trichomoniasis showed the greatest number of diagnoses in July, with a consistent reduction tendency until December, and an increase from January on. CONCLUSION: The Carnival period has no influence on the increase of gonorrhea, syphilis and trichomoniasis diagnoses in patients observed in a STD clinic in Niterói, Rio de Janeiro.

Analysis of molecular biology techniques for the diagnosis of human papillomavirus infection and cervical cancer prevention

The objective of the present study was to evaluate the usefulness of molecular methodologies to access human papillomavirus genome in the genital tract. Samples from 136 women aged 17 to 52 years old obtained from the Dr. Sérgio Franco Laboratories between 2000 and 2001, were analyzed by the hybrid capture assay and amplified by PCR with generic primers MY09/MY11 and specific primers for types 16, 18, 31, 33, 35, 58. Viral genome was detected in 71.3 percent of the samples by hybrid capture and 75 percent by amplification. When cytopathology was used as a reference method for screening lesions, hybrid capture (p=0) and amplification (p=0.002) presented positive association. The 3 methods showed absolute agreement when cytopathology confirmed papillomavirus infection and high grade intraepithelial lesion. Disagreements occurred for 10 cases: seven inflammatory cases positive by PCR and negative for hybrid capture and 3 low squamous intraepithelial lesions positive for hybrid capture but negative for amplification. In conclusion, hybrid capture was shown to be sensitive and specific enough for use in clinical routines. Moreover, the evaluation of viral load values obtained by this method were shown to be related to the severity of the lesion and merit further studies to analyze the possible association with risk of progression to malignancy.

O objetivo do nosso trabalho foi avaliar o emprego de métodos moleculares para comprovar a presença dos papilomavírus humanos no trato genital. Amostras de 136 pacientes com idades entre 17 e 52 anos, coletadas nos Laboratórios Dr. Sérgio Franco entre 2000 e 2001, foram analisadas pelas técnicas de captura híbrida e amplificação pela reação em cadeia da polimerase com primers genéricos MY09/MY11 e específicos para os tipos 16, 18, 31, 33, 35, 58. O genoma viral foi detectado em 71,3 por cento dessas amostras pela captura híbrida e 75 por cento pela reação em cadeia da polimerase. Quando a citopatologia foi usada como método de referência para rastreamento das lesões, a captura (p=0) e a amplificação (p=0,002) demonstraram associação positiva. Os três testes demonstraram concordância absoluta quando a citopatologia diagnosticou processo compatível com papilomavírus ou lesão intraepitelial de alto grau. Dez casos discordantes ocorreram: sete casos de citologia inflamatório positivos na reação em cadeia da polimerase mas negativos na captura híbrida e 3 casos de lesão de baixo grau positivas na captura híbrida e negativas pela reação em cadeia da polimerase. Concluímos que a captura híbrida apresentou sensibilidade e especificidade adequadas para uso clínico. Avaliação da carga viral obtida por esta metodologia relacionou-se com a severidade da lesão e merece estudos adicionais a fim de determinar seu valor prognóstico para o câncer.

HPV 16 detection in cervical lesions, physical state of viral DNA and changes in p53 gene

CONTEXT: Persistent infection with high risk human papillomavirus (HPV) has been linked to cervical carcinoma. Integration of viral DNA into host cell DNA is essential for this cancer development, promoting disruption of the HPV E2 gene, thus leading to unregulated increases in E6 and E7 proteins and inactivating the products of p53 and Rb tumor suppressor genes. OBJECTIVE: To investigate HPV 16 infection in cervical lesions, physical state of viral DNA and p53 gene alterations in a group of women attending a public health service. DESIGN: Prospective, non-controlled, transversal study. SETTING: Gynecological clinic of the School od Medicine, Universidade Federal Fluminense. SAMPLE: 43 consective patients with cervical lesions referred to our service. MAIN MEASUREMENTS: Cases were classified via cytology/histology as normal, HPV infection, condyloma, low-grade squamous intraepithelial lesion (LSIL), high-grade squamous intraepithelial lesion (HSIL) and carcinoma. HPV infection was studied via polymerase chain reaction (PCR) using two PCR primer sets, to determine DNA integration. p53 gene changes were investigated by single-strand conformation polymorphism (SSCP) analysis. RESULTS: One normal case, 7 HPV infections, 6 condylomas, 7 LSIL, 14 HSIL and 8 cancers were found, with 95 percent positive for HPV genome when tested using both L1 and E6 primers. HPV 16 was most prevalent (73.1 percent). HPV 16 DNA was integrated within the host genome in 3 LSIL. One LSIL progressed to HSIL by 13 months after first diagnosis. Among HPV 16-positive HSIL cases, 50 percent contained integrated viral DNA. HPV 16 E2 gene disruption was seen in 7 cancers (87.5 percent). Only smal-cell carcinoma showed intact HPV 16 E2 gene. Abnormal p53 bands detected by PCR/SSCP were observed in 4 cases: 2 squamous carcinoma with parametrium (exon 8) and two cervical intraepithelial neoplasia (CIN) III (exons 5 and 7). All cases presented HPV 16 E2 gene loss. CONCLUSIONS: The sample had a high rate of high-risk HPV detected in benign and malignant lesions; high cervical cancer burden; HPV 16 DNA integration in all except one case of cancer; p53 gene changes in CIN III and in invasive cancer cases associated with DNA integration

Analysis of the p53 gene and papillomavirus detection in smears from cervical lesions

CONTEXT: Alterations of the p53 tumor suppressor gene are correlated with a critical step in the development of many human cancers.The tumor suppressor gene functions include regulation of the cell cycle and the cellular response to DNA damage, initiation of DNA repair and replication, induction of apoptosis and promotion of cell differentiation. CASE REPORT: Smears from ten cases of cervical lesions were analyzed for status of exons 5-8 of the p53 gene using PCR/SSCP. HPV infection was also screened by the PCR method using two PCR primer sets. Changes in the p53 gene were observed in a case of squamous carcinoma and a case of asymptomatic cervical intraepithelial neoplasia grade III (CIN III). High-risk HPV was detected in both cases showing that HPV infection and p53 mutation are not exclusive events

Human papillomavirus infection and p53 overexpression associated to cervical cancer

Foram avaliadas 120 amostras de lesöes cervicais, a fim de detectar a presença de papilomavirus humano (HPV) e a superexpressäo da proteína p53. A infecçäo pelo HPV foi diagnosticada pela técnica de hibridizaçäo näo-isotópica. A prevalência do HPV nas lesöes cervicais estudadas foi de 84,2 por cento, variando de 95,2 em lesöes intra-epiteliais de grau I, a 84,4 por cento em carcinomas de células escamosas. A superexpressäo da proteína p53 foi detectada pela técnica de imunoistoquímica. Nossos resultados demonstraram a presença de alteraçöes na p53 em 32,5 por cento das lesöes avaliadas, com um padräo crescente de alteraçöes de 10 por cento em casos controles até 43,7 por cento em carcinomas invasivos. Foi também demonstrado que 25 por cento dos casos apresentavam simultaneamente a infecçäo pelo HPV e alteraçöes na p53. Em nosso estudo, também avaliamos as pacientes prospectivamente, por um período de seis anos. Cerca de 41 por cento das pacientes apresentaram quadro progressivo até NIC III ou carcinoma invasivo. Dentre elas, 83,3 por cento apresentaram infecçäo por HPV de alto risco e 66,5 por cento tiveram p53 alterada. Com relaçäo a estas altas taxas de alteraçöes na expressäo da p53 associadas com a infecçäo viral e a progressäo ao câncer, sugerimos que a superexpressäo da p53 pode näo ser essencial ao desenvolvimento de câncer, mas parece conferir uma maior probabilidade de crescimento das células malignas. Em conclusäo, alteraçöes na p53 e infecçäo pelo HPV podem cooperar para o estabelecimento de cânceres. A fim de colaborar nossos resultados, seräo necessários estudos acumulando dados epidemiológicos e genéticos da p53 e de seu câncer cervical